T3 – Elisa x 96 test

En el T3 EIA, una cierta cantidad de anticuerpo anti-T3 se recubre en microtitulación
pozos Una cantidad medida de suero del paciente y una cantidad constante de T3
conjugados con peroxidasa de rábano picante se añaden a los pocillos de microtitulación.
Durante la incubación, el anticuerpo anti-T3 se une al segundo anticuerpo en el
pozos, y T3 y T3 conjugado compiten por los sitios de unión limitados en el
anticuerpo anti-T3. Después de una incubación de 60 minutos a temperatura ambiente, los pocillos
se lavan 5 veces con agua para eliminar el conjugado T3 no unido. una solución de
Luego se agrega TMB y se incuba durante 20 minutos, lo que da como resultado el desarrollo
de color azul El desarrollo del color se detiene con la adición de HCl 2 N,
y la absorbancia se mide espectrofotométricamente a 450 nm. Él
la intensidad del color formado es proporcional a la cantidad de enzima presente
y está inversamente relacionado con la cantidad de T3 sin marcar en la muestra. Por
referencia a una serie de estándares T3 ensayados de la misma manera, la concentración
de T3 en la muestra desconocida se cuantifica.